يكشف لنا الرحلان الكهربي على عديد الأكريلاميد وجود الملوثات

إن أفضل طريقة لتحديد تجانس البروتينات هي الرحلان الكهربي على هلامة عديد الأكريلاميد (PAGE) تحت ظروف مختلفة أكثرها شيوعا هو وجود سلفات دوديسيل الصوديوم (SDS). هذا الأخير هو عبارة عن مطهر أيوني يفصل البروتينات عديدة المواحيد إلى وحيداتها. وبما أن كل رابطة ببتيدية ترتبط تقريباً بجزيئين من SDS، فإن عديد الببتيد يصبح حاملا لشحنة سلبية قوية. هذا يجعل المسافة التي يقطعها عديد الببتيد باتجاه المصعد (Anode) خلال الرحلان متعلقة فقط بكتلته الجزيئية النسبية (Mr). ومن الطرق الأخرى تطبيق تقنية PAGE في ظروفه الأصلية (دون وجود SDS أو أي من الممسخات الاخرى). هذه الظروف تسمح بالحفاظ على البنية الرابعية أحيانا النشاط التحفيزي للإنزيم أيضاً.

وفي تقنية ال PAGE ثنائية البعد (O'Farrell)، يفصل البعد. الأول البروتينات المتمسخة على أساس قيم بايائها (PI) عن طريق موازنتها في الحقل الكهربي الحاوي على مدروج اليوريا والباهاء (pH) المصان بواسطة بلمرات الكهارل المذبذبة (Polymerized ampholytes)؛ بعد ذلك يقوم البعد الثاني بفصل البروتينات، بعد معالجتها بـ SDS، على أساس الحجم الجزيئي لوحيداتها البروتيتية.

مواضيع ذات صلة

الطرد المركزي

كيمياء أنسجة الإنزيمات enzyme histochemistry

التقسيم الخلوي الثانوي للإنزيمات

تقدير المناعة الإشعاعية للإنزيمات

التقديرات الحركية المزدوجة coupled kinetic assays

تقدير حركية النشاط التحفيزي

التقدير الكمي لنشاط الإنزيم

تقدير الإنزيمات

اختيار المستحضر

isocitrate dehydrogenase

(Phosphofructokinase (PFKase

(Aspartate transcarbamoylase (AT Case