علم الكيمياء
تاريخ الكيمياء والعلماء المشاهير
التحاضير والتجارب الكيميائية
المخاطر والوقاية في الكيمياء
اخرى
مقالات متنوعة في علم الكيمياء
كيمياء عامة
الكيمياء التحليلية
مواضيع عامة في الكيمياء التحليلية
التحليل النوعي والكمي
التحليل الآلي (الطيفي)
طرق الفصل والتنقية
الكيمياء الحياتية
مواضيع عامة في الكيمياء الحياتية
الكاربوهيدرات
الاحماض الامينية والبروتينات
الانزيمات
الدهون
الاحماض النووية
الفيتامينات والمرافقات الانزيمية
الهرمونات
الكيمياء العضوية
مواضيع عامة في الكيمياء العضوية
الهايدروكاربونات
المركبات الوسطية وميكانيكيات التفاعلات العضوية
التشخيص العضوي
تجارب وتفاعلات في الكيمياء العضوية
الكيمياء الفيزيائية
مواضيع عامة في الكيمياء الفيزيائية
الكيمياء الحرارية
حركية التفاعلات الكيميائية
الكيمياء الكهربائية
الكيمياء اللاعضوية
مواضيع عامة في الكيمياء اللاعضوية
الجدول الدوري وخواص العناصر
نظريات التآصر الكيميائي
كيمياء العناصر الانتقالية ومركباتها المعقدة
مواضيع اخرى في الكيمياء
كيمياء النانو
الكيمياء السريرية
الكيمياء الطبية والدوائية
كيمياء الاغذية والنواتج الطبيعية
الكيمياء الجنائية
الكيمياء الصناعية
البترو كيمياويات
الكيمياء الخضراء
كيمياء البيئة
كيمياء البوليمرات
مواضيع عامة في الكيمياء الصناعية
الكيمياء الاشعاعية والنووية
فصل الانزيمات بتقنية كروموتوغرافيا الألفة حيث تتعرف اليجندات على مناطق نوعية في الإنزيمات
المؤلف:
د. روبرت موراي وآخرون
المصدر:
هاربرز في الكيمياء الحيوية
الجزء والصفحة:
ص 235
2-6-2021
2290
فصل الانزيمات بتقنية كروموتوغرافيا الألفة حيث تتعرف اليجندات على مناطق نوعية في الإنزيمات
تتمثل الخاصة الأبرز للاستشراب بالألفة (Affinity chromatography) في قدرته على النزع الانتقائي لبروتين معين واحد أو لعدد صغير من بروتينات معينة موجودة في مزيج بروتيني معقد. وتستخدم الطريقة لجيناً (Ligand) ثابتاً (غير متحرك) يتاثر نوعيا مع الإنزيم المطلوب تنقيته. وعندما يعرض مزيج البروتينات إلى هذا اللجين (الليجند)، ترتبط معه فقط تلك البروتينات التي تتاثر بقوة معه؛ أما البروتينات غير المرغوبة فتعبر العمود وتطرح مباشرة خارجه. يشطف بعد ذلك البروتين المرغوب عن اللجين المثبت باستخدام تركيز مرتفع من الملح أو الشكل الذواب للجين. وتكون عمليات التنقية المنجزة بطرق الاستشراب بالألغة فعالة، وتتفوق على التطبيق الناجح للطرق المدرسية الكثيرة.
ومن اللجائن المفضلة في هذه التقنية نذكر مشتقات الركائز أو التمائم الإنزيمية أو الأصبغة العضوية (Organic dyes) التي تعمل كمضاهيات نوكليوتيدية أو تميمية مرتبطة تساهميأ بدعامة خاملة (مثل سيفاديكس الدنا (DNA-Sefadex) أو السيفاروز الأزرق). وترتبط هذه اللجائن بالدعامة بواسطة جزيء رابط (Linker) يبلغ طوله 3-8 ذرات كربون ولكن يكن أن يعيق «الرابط» الكاره لمماء الفصل بإدخال عنصر الاستشراب باللجين الكاره للماء (انظر لاحقاً). ومن الأمثلة على نجاح الاستشراب بالألفة تنقية الكثير من نازعات الهيدروجين المختلفة على دعائم ذات ألفة للناد (+NAD). وفي حين أن الكثير من نازعات الهيدروجين يكن أن ترتبط وتشطف معاً عند معالجة العمود بالناد (+NAD) الذواب، فإن الاستعمال اللاحق لدعائم أليفة للركيزة (وليس التلميم الإنزيمي) أو الشطف باستخدام ((مزيج ثلاثي مجهض» (Abortive ternary mixture) لنا" واحد وركيزة واحدة قد أثبتئا نجاحهما في العديد من اكالات.
في الاستشراب باللجائن الكارهة للماء، يربط المركب الهيدروكربوني الألكيلي (Alkyl) أو الأريلي (Aryl) بدعامة مثل السفاديكس، ويشمل استبقاء البروتينات على هذه الدعائم تاثرات كارهة للماء بين الألكيل ومناطق من البروتين كارهة للماء أيضأ. وتوضع البروتينات في محاليل تحتوى على تركيز مرتفع من ملح ما (مثل سلفات الأمونيوم)، وتشطف بمداريج متناقصة من الملح نفسه.
قسم الشؤون الفكرية يصدر كتاب (سر الرضا) ضمن سلسلة (نمط الحياة)
المكياج بلا حدود.. ظاهرة متنامية تُقلق القيم وتُنهك الذات
جاهزية الاستعداد لشهر رمضان
