الطرق الكلاسيكية لتحديد الكتل الجزيئية النسبية للجزئيات تعتمد في دراستها على الخواص التجمعية في الجزئيات الضخمة حيث أن عدد الجزئيات فى المحلول يمكن أن يكون صغيراً جداً وذلك على الرغم من كبر الـ الكتلة الكلية فإن القياسات الأسموزية تكون ذات أهمية خاصة.

شكل (4) صورة بالميكروسكوب الإلكتروني للهيموجلوبين العلاقة الأساسية هي معادلة فانت هوف

nV = n_pRT    (1) حيث أن هو الضغط الأسموزي، np هي كمية المذاب في حجم قدره V من المحلول. حيث أن تركيز المذاب وهو في هذه الحالة من الجزئيات الكبيرة P هي [np/V=[P. وبطريقة أكثر بساطة نصل إلى :

n = RT [P] (2) وحيث أن التركيز [P] مرتبطاً بتركيز الكتلة Cp من خلال العلاقة p] =cp/Mm] حيث أن M_m هي الكتلة الجزيئية. توجد صورة n/cp = RT / Mm (3)

أخرى للمعادلة وهي:

الكتلة الجزيئية النسبية. Mr ، R.M.M للجزيء ترتبط بالكتلة المولارية بالعلاقة M=Mm/g mol (بمعنى أن R.M.M هي القيمة العددية للكتلة المولارية عندما يعبر عن الأخيرة بالجرام لكل مول). وقد وجد أن تقدير الضغط الأسموزي للمحلول المحتوى على كتلة ذات تركيز معلوم للجزئيات الضخمة تعطى الأخيرةR.M.M والجهاز المستخدم في تقدير الضغط الأسموزي مبين في الشكل (5).

يقاس الضغط الأسموزي من الزيادة فى الارتفاع h في العمود للمحلول باستخدام العلاقة II=pgh حيث p هي كثافة المحلول، g هي عجلة الجاذبية. وكالعادة هناك بعض الصعوبات. ثلاث منها ذات أهمية وهى:

 (a) الحيود عن المثالثة،

(b) وجود مدى من. R.M.M في خاصة العينة،

(c) وجود الشحنة على الجزئ الضخم.

الجزئيات الضخمة تعطى محاليل غير مثالية وذلك لكبرها النسبي وهي تحل محل كمية كبيرة من المذيب ولا تذوب بإحلالها محل جزئيات المذيب الانفرادية.