خطوات عمل الشريحة المجهرية للاكاروسات

Microscopic Slide Preparation Steps

لعمل الشريحة المجهرية يمكن اتباع الخطوات التالية:

1- يتم رفع العينة من محلول الترويق (اللاكتوفينول) ويتم غسلها 3-4 مرات في الماء في زجاجة ساعة، ويستمر الغسل بالماء لحين اختفاء عكورة اللاكتوفينول والماء.

2- يتم وضع قطرة من محلول هوير أو أي بيئة تحميل في وسط الشريحة الزجاجية.

3- ارفع العينة من زجاجة الساعة بواسطة نيدل أو شعرة رفيعة ثم ضعها في قطرة بيئة هوير.

4- باستخدام النيدل أو ملقط رفيع يتم فرش العينة بشكل جيد خاصة الأرجل والفكوك الملقطية مع تثبيت العينة على سطح الشريحة.

5- يتم رفع غطاء الشريحة بواسطة ملقط ثم توضع حافة الغطاء فوق حافة قطرة بيئة التحميل ثم وضع غطاء الشريحة على كامل القطرة بهدوء لمنع تكون فقاعات هوائية.

6- يتم وضع الشريحة بعد ذلك في فرن على درجة حرارة 45°م لمدة 48 ساعة ولغاية أسبوع. رفع درجة الحرارة لغاية 55°م يؤدي إلى تكون فقاعات عند حافة غطاء الشريحة.

7- بعد رفع الشريحة من الفرن، تترك عند درجة حرارة الغرفة لمدة أسبوع وذلك للسماح لغطاء الشريحة الأخذ وضعه النهائي، كما أن الحرارة العالية تؤدي إلى جفاف وتقلص العينة، فيما يؤدي انخفاض درجة الحرارة إلى اندفاع بيئة التحميل خارج غطاء الشريحة. وبعد الجفاف النهائي للشريحة يتم إزالة الزائد منها باستخدام شفرة حادة.

8- ضرورة عمل حلقة حول غطاء الشريحة من مادة Clyptal وهي صبغة مانعة للماء تستخدم للدوائر الكهربائية باستخدام فرشاة صغيرة رقم (1) بعد وضع الشريحة على لوح دوار.

9- ضرورة وضع علامة على الشريحة مثبت عليها مكان جمع العينة، تاريخها، العائل أو البيئة التي أخذ منها الحلم مع اسم القائم بعملية الجمع (الشكل التالي).

شريحة مجهرية زجاجية نموذجية. (عن Krantz ، 1978)