المرجع الالكتروني للمعلوماتية
المرجع الألكتروني للمعلوماتية

علم الاحياء
عدد المواضيع في هذا القسم 10456 موضوعاً
النبات
الحيوان
الأحياء المجهرية
علم الأمراض
التقانة الإحيائية
التقنية الحياتية النانوية
علم الأجنة
الأحياء الجزيئي
علم وظائف الأعضاء
المضادات الحيوية

Untitled Document
أبحث عن شيء أخر المرجع الالكتروني للمعلوماتية
القيمة الغذائية للثوم Garlic
2024-11-20
العيوب الفسيولوجية التي تصيب الثوم
2024-11-20
التربة المناسبة لزراعة الثوم
2024-11-20
البنجر (الشوندر) Garden Beet (من الزراعة الى الحصاد)
2024-11-20
الصحافة العسكرية ووظائفها
2024-11-19
الصحافة العسكرية
2024-11-19



Pyrosequencing  
  
1681   07:13 صباحاً   التاريخ: 24-10-2019
المؤلف : د.زهرة محمود الخفاجي
الكتاب أو المصدر : موسوعة الحياة
الجزء والصفحة :
القسم : علم الاحياء / الأحياء الجزيئي / مواضيع عامة في الاحياء الجزيئي /


أقرأ أيضاً
التاريخ: 24-4-2021 2253
التاريخ: 20-8-2020 1938
التاريخ: 8-4-2021 2264
التاريخ: 1-1-2021 2144

Pyrosequencing

 

احدى طرق Next Generation Sequencing لتحديد تواليات القواعد النتروجينية في DNA .تستعمل للعديد من الاغراض في مجال علوم الحياة . تختلف الطريقة عن الطرق التقليدية مثل طريقة Sanger في انها تعتمد في تحديد التواليات على عمليات التخليق للDNA اي انها Sequencing by Synthesis ،  تمتاز الطريقة بالانضباط والدقة والمرونة لذلك يكمن ان تستعمل في تحديد SNPs وكذلك قطع DNA القصيرة جدا ، ويمكن ان تحول الى شكل آلي وبعيدا عن البواديء او النيوكلوتيدات المعلمة (Labelled) . ظهرت الطريقة بداية القرن الواحد والعشرون للتغلب على بعض المصاعب التي تلاقيها الطرق التقليدية . طورت الطريقة في المعهد الملكي للتقنيات Royal Institute of Technology.
تعتمد الطريقة على استعمال نظام انزيمي مكون من اربعة انزيمات وتفاعلاتها مجملة في الاتي :

يستعمل DNA Polymerase وخاصة Klenow Fragment من بكتريا Escherichia coli وانزيمات اخرى . في البداية يمسخ DNA المعني الى اشرطة مفردة ثم تضاف المكيفات Adaptors الى الاشرطة المفردة وتثبت على مساند خاصة :

ثم يضاف محلول يحوي على احد القواعد النتروجينية الاربعة ويسمح للتفاعل بالحدوث ، وعند ارتباط القاعدة النتروجينية مع ما يقابلها من القواعد في شريط DNA تنطلق (PPi( Pyrophosphate التي تكون ذات طاقة عالية لذا تستغل وتحول الى ATP بواسطة انزيم ATP Sulfurylase المشتق من خميرة الخبز ، وبمساعدة انزيم Luciferase ( المشتق من ذبابة النار Photinus pyralis يحول Luciferin الى Oxyluciferin مطلقا الضوء الذي يسجل بمجسات خاصة عند طول موجي 560 نانومتر وتكون شدة الضوء متناسبة مع عدد جزيئات ATP .

وبعد ذلك يقوم الانزيم Apyrase المشتق من البطاطا Solanum tuberosum بتفكيك النيوكلوتيدات التي لم ترتبط .


بعد انتهاء هذا التفاعل يضاف المحلول الحاوي على قاعدة نتروجينية اخرى لتعاد دورة تفاعلات الانزيمات المذكورة آنفا ، ويحصل هذا للقواعد النتروجينية الاربعة الداخلة في تركيب DNA.
يمكن ان تتم العملية باستعمال الطور الصلب اذ تثبت الجزيئات المراد تحديد توالياتها على مساند صلبة ملائمة ، او
 يمكن ان تتم في الطور السائل بعد اجراء التحويرات اللازمة . ويمكن اجمال العملية بالمخطط الاتي :

وتسجل النتائج في لوحات المخرجات كالاتي :




 




علم الأحياء المجهرية هو العلم الذي يختص بدراسة الأحياء الدقيقة من حيث الحجم والتي لا يمكن مشاهدتها بالعين المجرَّدة. اذ يتعامل مع الأشكال المجهرية من حيث طرق تكاثرها، ووظائف أجزائها ومكوناتها المختلفة، دورها في الطبيعة، والعلاقة المفيدة أو الضارة مع الكائنات الحية - ومنها الإنسان بشكل خاص - كما يدرس استعمالات هذه الكائنات في الصناعة والعلم. وتنقسم هذه الكائنات الدقيقة إلى: بكتيريا وفيروسات وفطريات وطفيليات.



يقوم علم الأحياء الجزيئي بدراسة الأحياء على المستوى الجزيئي، لذلك فهو يتداخل مع كلا من علم الأحياء والكيمياء وبشكل خاص مع علم الكيمياء الحيوية وعلم الوراثة في عدة مناطق وتخصصات. يهتم علم الاحياء الجزيئي بدراسة مختلف العلاقات المتبادلة بين كافة الأنظمة الخلوية وبخاصة العلاقات بين الدنا (DNA) والرنا (RNA) وعملية تصنيع البروتينات إضافة إلى آليات تنظيم هذه العملية وكافة العمليات الحيوية.



علم الوراثة هو أحد فروع علوم الحياة الحديثة الذي يبحث في أسباب التشابه والاختلاف في صفات الأجيال المتعاقبة من الأفراد التي ترتبط فيما بينها بصلة عضوية معينة كما يبحث فيما يؤدي اليه تلك الأسباب من نتائج مع إعطاء تفسير للمسببات ونتائجها. وعلى هذا الأساس فإن دراسة هذا العلم تتطلب الماماً واسعاً وقاعدة راسخة عميقة في شتى مجالات علوم الحياة كعلم الخلية وعلم الهيأة وعلم الأجنة وعلم البيئة والتصنيف والزراعة والطب وعلم البكتريا.