النبات
مواضيع عامة في علم النبات
الجذور - السيقان - الأوراق
النباتات الوعائية واللاوعائية
البذور (مغطاة البذور - عاريات البذور)
الطحالب
النباتات الطبية
الحيوان
مواضيع عامة في علم الحيوان
علم التشريح
التنوع الإحيائي
البايلوجيا الخلوية
الأحياء المجهرية
البكتيريا
الفطريات
الطفيليات
الفايروسات
علم الأمراض
الاورام
الامراض الوراثية
الامراض المناعية
الامراض المدارية
اضطرابات الدورة الدموية
مواضيع عامة في علم الامراض
الحشرات
التقانة الإحيائية
مواضيع عامة في التقانة الإحيائية
التقنية الحيوية المكروبية
التقنية الحيوية والميكروبات
الفعاليات الحيوية
وراثة الاحياء المجهرية
تصنيف الاحياء المجهرية
الاحياء المجهرية في الطبيعة
أيض الاجهاد
التقنية الحيوية والبيئة
التقنية الحيوية والطب
التقنية الحيوية والزراعة
التقنية الحيوية والصناعة
التقنية الحيوية والطاقة
البحار والطحالب الصغيرة
عزل البروتين
هندسة الجينات
التقنية الحياتية النانوية
مفاهيم التقنية الحيوية النانوية
التراكيب النانوية والمجاهر المستخدمة في رؤيتها
تصنيع وتخليق المواد النانوية
تطبيقات التقنية النانوية والحيوية النانوية
الرقائق والمتحسسات الحيوية
المصفوفات المجهرية وحاسوب الدنا
اللقاحات
البيئة والتلوث
علم الأجنة
اعضاء التكاثر وتشكل الاعراس
الاخصاب
التشطر
العصيبة وتشكل الجسيدات
تشكل اللواحق الجنينية
تكون المعيدة وظهور الطبقات الجنينية
مقدمة لعلم الاجنة
الأحياء الجزيئي
مواضيع عامة في الاحياء الجزيئي
علم وظائف الأعضاء
الغدد
مواضيع عامة في الغدد
الغدد الصم و هرموناتها
الجسم تحت السريري
الغدة النخامية
الغدة الكظرية
الغدة التناسلية
الغدة الدرقية والجار الدرقية
الغدة البنكرياسية
الغدة الصنوبرية
مواضيع عامة في علم وظائف الاعضاء
الخلية الحيوانية
الجهاز العصبي
أعضاء الحس
الجهاز العضلي
السوائل الجسمية
الجهاز الدوري والليمف
الجهاز التنفسي
الجهاز الهضمي
الجهاز البولي
المضادات الحيوية
مواضيع عامة في المضادات الحيوية
مضادات البكتيريا
مضادات الفطريات
مضادات الطفيليات
مضادات الفايروسات
علم الخلية
الوراثة
الأحياء العامة
المناعة
التحليلات المرضية
الكيمياء الحيوية
مواضيع متنوعة أخرى
الانزيمات
Dye precipitation
المؤلف:
Clive Dennison
المصدر:
A guide to protein isolation
الجزء والصفحة:
17-4-2016
1249
Dye precipitation
For the reaction:-
Protein in solution -------- Protein precipitate
most of the methods discussed above may be called “pushing” methods, in that the properties of the solution are changed, making these unsuitable for protein dissolution, i.e. the protein is pushed out of solution. If the protein is present at a very low concentration, in a large volume of solution, “pushing” methods can be quite uneconomical as the amount of precipitant required is proportional to the total solution volume, and often inversely proportional to the protein concentration. The alternative is a “pulling” method, in which properties of the protein are changed so that it comes out of solution. The push/pull terminology is due to Dr Rex Lovrien, of the University of Minnesota.
An example of a pulling method is dye precipitation or, as it has been called, “matrix co-precipitation”. Proteins are kept in solution by the disposition of charged, hydrophilic, groups on their surfaces. At low pH these are mainly positive and at high pH mainly negative. Dyes, on the other hand, are typically salts of strong acids or bases with attached aromatic groups having extended conjugation, which gives rise to their colour. If a dye having a negatively charged sulfonic acid group is added to a positively charged protein, ionic bonds will form between the dye and the protein. As a result, bulky, hydrophobic groups will become attached to the protein at its previously positive sites and the protein will be precipitated out of solution. An advantage of this method is that the amount of dye required is proportional to the moles of protein present, not to the volume of solution, so it is particularly suitable for harvesting proteins from dilute solutions.
After precipitation, it is necessary to separate the protein from the complexed dyestuff. This can be accomplished either by ion-exchange or by TPP. In TPP, the high salt concentration breaks the ionic bonds and the released dye is extracted into the t-butanol layer. Since dye precipitation is a pulling method and TPP is a “pushing” method, the sequential application of these two could be described as a “pull -push” method.
References
-Dennison, C. (2002). A guide to protein isolation . School of Molecular mid Cellular Biosciences, University of Natal . Kluwer Academic Publishers new york, Boston, Dordrecht, London, Moscow .
الاكثر قراءة في عزل البروتين
اخر الاخبار
اخبار العتبة العباسية المقدسة

الآخبار الصحية
