الغرض من الاختبار Purpose

يستعمل هذا الاختبار للتمييز بين البكتيريا التي لها القابلية على الحركة وتكوين كبريتيد الهيدروجين والاندول ، اذ يستعمل للتمييز مثلا بكتيريا Proteus vulgaris التي تكون متحركة ومكونة لـ H2S وبكتيريا Klebsiella pneumonia التي تكون غير متحركة وغير مكونة لـ H2S .

مبدأ الاختبار Principle

 يوجد العديد من البروتينات التي تكون غنية بالأحماض الامينية التي تحتوي الكبريت مثل السيستين ، وعند تحلل تلك البروتينات مائيا بوساطة بعض انواع البكتيريا يتم تحرير الأحماض الأمينية، يفقد السيستين ذرة الكبريت بوجود انزيم cysteine desulfurase و من خلال إضافة الهيدروجين الناتج من الماء  يكون غاز كبريتيد الهيدروجين ، و كما يمكن إنتاج كبريتيد الهيدروجين الغازي عن طريق اختزال المركبات الحاوية على الكبريت غير العضوية مثل ثيوسلفات(^-2 S₂O₃) ، والكبريتات (^-2 S0₄ ) ، أو الكبريتيد (^-2 SO₃ )، فان بعض البكتيريا تقوم بهضم ثيوسلفات الصوديوم sodium thiosulfate ثم اختزاله إلى كبريتات sulfite باستعمال إنزيم اختزال ثيوكبريتات thiosulfate reductase ، و تحرر غاز كبريتيد الهيدروجين. يحتوي وسط اكار SIM Agar الببتون و ثيوسلفات الصوديوم sodium thiosulfate كمادة اساس وكبريتات الأمونيوم الحديدية ferrous ammonium sulfate NH4)SO4)Fe كدليل على انتاج H2S والسستين يعد من مكونات الببتونات المستعملة في وسط SIM ، قلة نسبة الاكار في الوسط يجعله شبه صلب. بمجرد إنتاج H2S فإنه يتحد مع كبريتات الأمونيوم الحديدية ويكون راسب أسود غير قابل للذوبان من كبريتيد الحديديك يمكن رؤيته حول منطقة التلقيح واذا كان الكائن الحي متحركًا أيضا ، قد يتحول الأنبوب إلى اللون الأسود بالكامل. يدل اللون الأسود في الأنبوب الى نتيجة موجبة لـ H2S ، وعدم وجود راسب أسود يدل الى سلبية النتيجة. يمكن أيضا استعمال وسط SIM للكشف عن وجود أو غياب الحركة في البكتيريا فضلا عن إنتاج الإندول . امتداد النمو عن منطقة التلقيح يدل على حركة البكتيريا في الوسط الزرعي اذا تهاجر البكتيريا المتحركة من خط التلقيح لتشكيل عكارة كثيفة في الوسط المحيط بينما عدم امتداد النمو يشير الى عدم قابلية البكتريا على الحركة .