تعتمد هذه الطريقة على قدرة إنزيم البلمرة DNA polymerase I على ملء الثغرات المتكونة على محور الفوسفات ثنائية الأستر (Phosphodiester) للDNA، وقد تتكوّن هذه الثغرات إما طبيعياً أو بإضافة تراكيز منخفضة من الإنزيم 1 DNase في محلول التفاعل مكوّناً نهايات حرة هيدروكسيلية (3'  -  OH)  وفسفورية (5'- phosphoryl)، وعند إضافة إنزيم البلمرة فإنه يُحفز عملية إحلال النيوكليوتيدات المفقودة وبناء الأطرف الحرّة، وذلك بإدخال مجموعات من dNTPs , فاذا كانت واحدة منها مُعلمة سيكون ال DNA الناتج موسوماً بالعنصر المشع بحيث يمكن الاستدلال عليه .