تحميل الأكاروسات على شرائح وتجهيزها للدراسة المجهرية

لتجهيز الأكاروسات للدراسة المجهرية يمكن اتباع الخطوات الأتية:

1- تنظيف وتوضيح العينات Clearing/Maceration of Specimens

يتم عادة تحميل الأكاروسات على شرائح زجاجية خاصة بالدارسات المجهرية وهذه العملية تتطلب أن يكون جسم الأكاروس في الشريحة نظيفا وشفافا خاصة مع الأكاروسات ذو الكيوتكل السميك والغامق وهي مسألة ضرورية لرؤية وفحص التراكيب الدقيقة لجسم الأكاروسات وعليه فإن توضيح العينة قبل عمل الشريحة مسألة مهمة جدا ويتم هذا باستخدام عدد من المحاليل من أشهرها محلول لاکتوفينول Lacto phenol وهو محلول تنظيف وترويق قوي يتكون من:

50 جزء حامض الخليك Lactic acid

25 جزء بلورات الفينول Phenol Crystal

5 جزء ماء مقطر Distilled Water

كما يمكن استخدام المحلول المائي لحامض الخليك بتركيز 50 - 95 % ايضا في عملية تنظيف وترويق العينات لتجهيزها للدارسة المجهرية أن كلا المحلولين يمكن استخدامهما بنجاح لتنظيف وترويق الأكاروسات نباتي التغذية وذلك بوضع عينات الأكاروسات في أحد المحلولين لمدة أسبوع على درجة حرارة الغرفة أنواع الأكاروسات الصغيرة الحجم وذات الاجسام الرخوة يمكن تنظيفها بفترة اقل من أسبوع ولتسهيل عملية توضيح عينة الأكاروسات كبير الحجم يمكن عمل ثقب في منطقة الجسم ليتمكن محلول لاکتوفينول من النفاذ بسرعة إلى داخل جسم الأكاروسات كما يمكن استخدام التسخين لتسريع عملية التنظيف والترويق ويفضل نقل عينة الأكاروسات التي تم نقلها إلى ماء مقطر لتنظيفها من متبقيات محلول الترويق قبل استخدامها في عمل الشريحة المجهرية.

2. عمل الشرائح المؤقتة Temporary Mounts

يمكن عمل شريحة مؤقتة للحلم باستخدام حامض الخليك Lactic acid وذلك بوضع قطرة من حامض الخليك حيث توضع القطرة في وسط الشريحة الزجاجية ثم يتم نقل الأكاروسات إلى وسط القطرة بواسطة دبوس أو فرشاة صغيرة بعدها تتم عملية فرد اجزاء الأكاروسات وتوجيه وضعية جسم الأكاروسات بالشكل المناسب للدراسة ويفضل أن توضع عينة الأكاروسات تارة على السطح الظهري واخرى على السطح البطني لكي تسهل عملية دراسة السطح الظهري والبطني وما عليها من صفائح وشعيرات وزوائد بعد ذلك يتم وضع غطاء الشريحة ايضا يمكن تحميل الأكاروسات في شريحة مقعرة يتم تغطيتها بغطاء شريحة مربع الشكل.

3. عمل الشرائح الدائمة - Permanent Mounts:

ان عمل الشرائح الدائمة للحلم يتطلب استخدام انواع معينة من بيئات التحميل للحفاظ على عينة الأكاروسات سليمة لأطول فترة ممكنة منها:

بيئة هوير

بيئة اللاكتوفينول

بيئة الراتنج

بعد اختيار بيئة التحميل المناسبة يتم عمل الشريحة الدائمة وفق الخطوات الاتية:

• يتم وضع قطرة من محلول هوير أو أي بيئة تحميل في وسط الشريحة الزجاجية.

• وضع نموذج الأكاروسات في وسط قطرة محلول الهوير ثم يتم فرد أجزاء الأكاروسات باستعمال النيدل.

• قبل وضع غطاء الشريحة يتم تجفيف الشريحة إلى أن تستقر بيئة التحميل ويلتصق الأكاروسات على الشريحة بشكل جيد ويتم التجفيف داخل فرن أو على صفيحة حارة عند درجة حرارة 40 م لأكثر من ثلاث ساعات.

• وضع قطرة أخرى من بيئة هوير ثم ضع غطاء الشريحة فوق حافة قطرة بيئة التحميل ثم يوضع غطاء الشريحة على كامل القطرة بهدوء لمنع تكون فقاعات هوائية يفضل عند الانتهاء من عمل الشريحة أن يتم تأشير موقع الأكاروسات في الشريحة وذلك بعمل دائرة حول الأكاروسات بواسطة قلم ماجك كما يفضل تسخين الشريحة على درجة 60 م إلى أن تتوضح العينة ثم يتم كتابة المعلومات الخاصة بالشريحة من حيث تاريخ الجمع - موقع الجمع - العائل النباتي - وغيرها من المعلومات.

• ضرورة عمل حلقة حول غطاء الشريحة من مادة - Glyptic وهي صبغة مانعة للماء باستخدام فرشاه.